آیا می توان از لوله های سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون مجدد استفاده کرد؟در اینجا پاسخ است

لوله سانتریفیوژ یک لوله ساده است که می تواند سرعت و فشار چرخشی بالایی مانند جداسازی برخی از نمونه ها و جداسازی رسوبات رویی را تحمل کند.لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون دارای دو قسمت مشابه لوله داخلی و لوله خارجی است.لوله داخلی غشایی با وزن مولکولی مشخص است.در طول سانتریفیوژ با سرعت بالا، آنهایی که وزن مولکولی کمتری دارند به لوله پایینی (یعنی لوله بیرونی) نشت می کنند و آنهایی که وزن مولکولی بیشتری دارند در لوله بالایی (یعنی لوله داخلی) به دام می افتند.این اصل اولترافیلتراسیون است و اغلب برای تغلیظ نمونه ها استفاده می شود.

لوله های سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون معمولاً می توانند بدون پیش تصفیه استفاده شوند، اما برای پردازش نمونه پروتئین، به ویژه برای محلول های پروتئین رقیق (< 10 میکروگرم در میلی لیتر)، سرعت بازیابی غلظت با غشاهای اولترافیلتراسیون اغلب کمی نیست.اگرچه مواد PES جذب غیر اختصاصی را به حداقل می رساند، برخی از پروتئین ها، به خصوص زمانی که رقیق هستند، ممکن است مشکلاتی داشته باشند.درجه اتصال غیر اختصاصی با ساختار هر پروتئین متفاوت است.پروتئین های حاوی دامنه های باردار یا آبگریز احتمال بیشتری دارد که به طور برگشت ناپذیری به سطوح مختلف متصل شوند.پیش تصفیه غیرفعال بر روی سطح لوله سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون می تواند از دست دادن جذب پروتئین در سطح غشاء را کاهش دهد.در بیشتر موارد، پیش تیمار ستون قبل از تغلیظ محلول پروتئین رقیق می‌تواند سرعت بازیابی را بهبود بخشد، زیرا محلول می‌تواند محل‌های جذب پروتئین خالی در معرض غشاء و سطح را پر کند.روش غیرفعال سازی به این صورت است که ستون را با حجم بیشتری از محلول غیرفعال به مدت بیش از 1 ساعت خیس کنید، ستون را کاملاً با آب مقطر بشویید و سپس آن را یک بار با آب مقطر سانتریفیوژ کنید تا محلول غیرفعال سازی که ممکن است روی فیلم باقی بماند کاملاً خارج شود. .مراقب باشید که فیلم پس از غیرفعال شدن خشک نشود.اگر می خواهید بعداً از آن استفاده کنید، باید آب مقطر استریل را اضافه کنید تا فیلم مرطوب بماند.

لوله های سانتریفیوژ اولترافیلتراسیون معمولاً نمی توانند استریل شوند و دوباره مورد استفاده قرار گیرند.از آنجایی که قیمت یک لوله واحد ارزان نیست، بسیاری از مردم سعی می کنند از آن مجددا استفاده کنند - تجربه این است که سطح غشاء را با آب مقطر چندین بار تمیز کنید و یک یا دو بار آن را سانتریفیوژ کنید.لوله کوچکی که قابلیت سانتریفیوژ معکوس دارد را می توان در آب مقطر غوطه ور کرد و سپس برای دفعات بیشتری برعکس سانتریفیوژ کرد که بهتر خواهد بود.می توان آن را برای یک نمونه به طور مکرر استفاده کرد و در صورت عدم استفاده می توان آن را در آب مقطر خیس کرد، اما باید از آلودگی باکتریایی جلوگیری کرد.نمونه های مختلف را با هم مخلوط نکنید.برخی افراد می گویند که خیساندن در الکل 20٪ و 1n NaOH (هیدروکسید سدیم) می تواند از رشد باکتری ها جلوگیری کرده و از خشک شدن آن جلوگیری کند.تا زمانی که غشای اولترافیلتراسیون به آب حمله می کند، نمی توان اجازه داد خشک شود.با این حال، دیگران می گویند که ساختار غشاء را از بین می برد.در هر صورت، سازندگان عموماً از استفاده مجدد پشتیبانی نمی کنند.استفاده مکرر اندازه منافذ غشاء فیلتر را مسدود می کند و حتی باعث نشت مایع می شود که بر نتایج تجربی تأثیر می گذارد.